缓冲液（Buffersolution）通常是由「弱酸及其共轭碱」或「弱碱及其共轭酸」缓冲对所组成的溶液，能够在加入一定量其他物质时减缓pH的改变。生化实验室常用的缓冲系主要有Tris（三羟甲基氨基甲烷）、磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸等，生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。
一、Tris缓冲液的优点
①因为Tris碱的碱性较强，所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液；
②对生物化学过程干扰很小，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。
③在水中溶解度高，对很多酶呈惰性反应
④缓冲能力高，一般用于稳定反应体系的pH，在pH7.5-9.0之间有较强的缓冲能力。
二、Tris缓冲液使用注意事项：
1、缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，缓冲液稀释十倍，pH值的变化大于0.1，常配成pH值为6.8，7.4，8.0，8.8。
2、温度效应大，温度变化对缓冲液pH值的影响很大，△pKa／℃＝－0.，一般温度每升高一度，PH值下降0.03。例如：4℃时缓冲液的pH＝8.4，室温时pH=7.8，37℃时的pH＝7.4，所以一定要在使用温度下进行配制，室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃～4℃；4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时，其氢离子浓度就增加了10倍。在pH7.5以下，其缓冲能力极为不理想。
3、易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封；
4、此缓冲液对某些pH电极发生一定干扰作用，所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。
5、它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑制作用。
6、为了保证缓冲溶液有足够强的缓冲能力，在配制缓冲溶液时，需要做到：为使共轭酸碱对的浓度比接近于1，应根据所需要维持的pH范围选择合适的缓冲对，使其中的弱酸的PKa等于或接近于所要求的pH。
三、Tris缓冲液pH范围
Tris缓冲液在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂，它的常用有效pH范围是在“中性”范围，如：
Tris-HCl缓冲液：pH＝7.5～8.5
Tris-磷酸盐缓冲液：pH＝5.0～9.0
除TRIS-hcl外，TRIS还有多种衍生化缓冲：
TBS=Tris-HCl+NaCl+KCl常用来清洗免疫染色组织或Westernblotting中的Westernblotting膜；
TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20，一种常用于WesternBlotting的膜缓冲液；
TE=Tris-HCl+EDTA，对DNA碱基具有保护作用，常用于DNA的稳定和储存；
TAE=Tris碱+乙酸+EDTA，是一种广泛应用于短片段DNA电泳的缓冲体系；
TBE=三碱基+硼酸+EDTA，适用于长期DNA电泳，对小片段有较好的分离效果。
